试剂

(1) 包被缓冲液(PH9.60.05M碳酸盐缓冲液):

Na2CO3 1.59克

NaHCO3 2.93克

加蒸馏水至1000ml

(2) 洗涤缓冲液(PH7.4PBS):0.15M

KH2PO4 0.2克

Na2HPO4·12H2O 2.9克

NaCl 8.0克

KCl 0.2克

Tween-20 0.05% 0.5ml

加蒸馏水至1000ml

(3) 稀释液:

牛血清白蛋白 (BSA) 0.1克

加洗涤缓冲液至100ml

或以羊血清、兔血清等血清与洗涤液配成5~10%使用。

(4) 终止液(3M H2SO4):

蒸馏水178.3ml，逐滴加入浓硫酸(98%)21.7ml。

(5) 底物缓冲液(PH5.0磷酸枣柠檬酸):

0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml

0.1M柠檬酸(19.2克/L) 24.3ml

加蒸馏水50ml。

(6) TMB(四联苯胺 )使用液:

TMB(10mg/5ml无水乙醇)0.5ml

底物缓冲液(PH5.5) 10ml

0.75%H2O2 32μl

(7) AS使用液:

AS 0.5mg

底物缓冲液(PH5.5) 1ml

3%H2O2 2μl

(8) 抗原、抗体和酶标记抗体。

(9) 正常人血清和阳性对照血清。

器材

(1) 聚苯塑料 板(简称酶标板)40孔或96孔，ELISA检测仪，50μl及100μl加样器，塑料滴头，小毛巾，洗涤瓶。

(2) 小烧杯、玻璃棒、试管、吸管和量筒等。

(3) 4℃冰箱，37℃孵育箱。